摘要

　　小鼠和大鼠用"李氏5号方"每天1、2和4g/kg体重灌胃给药，每天一次，共10~18天。初步研究结果表明，该药有以下药理作用：
一、 促进学习和记忆
1、对小鼠记忆获得障碍有明显的改善作用。
2、改善小鼠记忆再现障碍。
3、改善小鼠记忆巩固障碍。
　　4、提高小鼠空间辨别能力，使小鼠在迷宫中学习成绩明显提高。
5、促进未成年大鼠条件反射的形成，使未成年鼠穿梭箱反应条件反射主动回避阳性率明显提高、条件反射形成速度加快。
同时脑内RNA含量增加。
二、 改善脑内能量代谢
1、延长小鼠断头后张口喘气时间及常压缺氧时小鼠存活时间。
2、使大鼠急性不完全性脑缺血时脑组织含水量减少，脑组织蛋白含量增加幅度（反映血浆蛋白外渗）减轻，缺血时脑水肿减轻。说明其有抗脑缺血作用。
3、使缺血大鼠脑组织过氧化脂质代谢产物丙二醛生成减少，说明其有抑制自由基生成、减轻细胞损伤的作用。
4、使缺血时大鼠脑ATP消耗减少、乳酸生成减少，说明其有改善脑能量代谢的作用。
三、 对躯体及脑发育的影响
1、促进发育期大鼠体重增长。
2、提高未成年大鼠脑内RNA含量，促进氢可型肾虚幼年大鼠脑蛋白质合成，表明有促进脑发育作用。
3、本药尚能使氢可型肾虚小鼠肝、脾、胸腺细胞增生，肝、胸腺蛋白合成增多，正常大鼠血红蛋白含量增加，并促进动物体重增加。这些生长激素样作用，可能和增强多巴胺能神经功能，促进生长激素释放有关。
四、使左旋多巴诱发的小鼠刻板抬头运动增强，表明有增强多巴胺能神经功能的作用。
李氏5号方胶囊（简称李氏5号方）为一临床验方，由20多味中药组成。经临床观察证实，对精神发育迟滞有明显的治疗作用。对脑型瘫痪有促智、改善运动障碍及感觉障碍的作用。为了对该药的临床用药提供理论依据，本文对李子中治疗脑病的促智作用等主要药效学进行了研究。
材料和方法
一、材料
李氏5号方胶囊用前用蒸馏水制成混悬液。氢溴酸东莨菪碱注射液为成都一厂产品，批号900501。脑复康胶囊（乙酰胺吡咯烷酮）为兰州制药厂产品，批号940601，用前用蒸馏水溶解。氢化可的松注射液，上海信谊药厂产品，批号941203。氯丙嗪注射液为江苏无锡制药厂产品，批号930501。盐酸左旋多巴为上海奉贤制药厂产品，批号940719，每0.25g加1滴吐温-80后加水制成乳剂，盐酸氟桂嗪（Flunarizine）为西安杨森制药有限公司产品，尼莫地平为珠海经济特区丽珠药厂产品，均用蒸馏水溶解。荧光素酶由中科院上海植物物理研究所提供。硫代巴比妥酸用（TBA）0.1mol/L NaOH溶解。
实验用wistar大鼠购自兰州医学院实验动物中心（合格证号普002~02），昆明种小鼠购自卫生部兰州生物制品研究所动物室（合格证：普001-01），11~14g体重（25日龄）为未成年小鼠，18g以上体重为成年小鼠。
二、方法
1、 小鼠学习和记忆能力测定⑴
⑴ 跳台法：实验装置为一长方形反射箱，大小为72×10×10cm，用黑色塑料板分为6间，底面辅以铜栅。间距为0.5cm可以通电（40V），每间左右角置一高和直径均为4.5cm的绝缘平台。
实验分训练和测验两个阶段。训练时先将小鼠放入反应箱内适应3分钟，然后立即通以40V交流电，动物受到电击后跳回平台以躲避电击为正确反应，如再次跳到铜栅上受到电击，即为错误反应。如此训练5分钟，记录每鼠的错误反应次数，作为学习成绩。24小时后重作测验，测验时将小鼠平稳放在跳台上，记录第一次跳下平台的潜伏期和5分钟内错误反应次数，作为动物的记忆保持能力。
（2）Y型电迷宫法：该装置为一夹角为120度的等臂长幅式迷路箱，箱底铺以铜栅，实验时通40V交流电。该装置分起步区、电击区和安全区。训练时将小鼠放入起步区适应1分钟后通电，让小鼠偶然进入安全区逃避电击后，令其停留30秒，以巩固记忆。然后又以起步区为起点，重复训练。当小鼠遭遇电击直接逃避至安全区为正确反应，进入电击区或返回起步区为错误反应。以小鼠9/10次正确反应作为达标，记录达标电击次数，作为学习能力。
⑶避暗法：测定箱为相通的明暗两室，明室大小为15×9×23cm，底部铺以铜栅（不通电）；暗室大小13×12×28cm，底部铜栅通以40V交流电。明、暗室之间隔板上开一直径为3cm圆洞，明室25cm高处装一100w钨丝灯，小鼠有喜暗恶明、喜钻洞的习性。将小鼠放入明室，很快钻入暗室。暗室底部通电，小鼠进入暗室后受到电击，迫使其逃回明室，并获得记忆。实验时将小鼠面部背向洞口放入明室，同时启动计时器。动物穿过洞口进入暗室受到电击即停止记时。取出小鼠，记录每鼠从放入明室进入暗室遇电击所需的时间，此即潜伏期。24小时后重新测验，记录进入暗室的潜伏期和5分钟内的电击次数（错误次数），做为记忆成绩。
2、 大鼠穿箱主动回避反应条件反射形成测定
穿梭箱为60×30×30cm大小，内均为2室，室间有6×7cm拱形小门相通。箱底由直径为2mm的钢棒铺成，间距7mm，可通交流电（50HZ、30V），产品足电震，作为非条件刺激。两室各装一灯（15W），以灯光条件刺激。实验时先将大鼠置于箱内适应90秒，然后在大鼠所在室亮灯15秒，若大鼠在灯亮后5秒时不从明室逃回暗室，则明室电栅通电刺激10秒。间隔15秒后，从大鼠所在室为起点，重复上述实验。每天训练30次，连续9天。训练时如大鼠在灯亮后5秒内即逃向暗侧，则为主动回避反应阳性，电击后逃向暗处为主动回避反应阴性。观察药物对大鼠主动回避反应阳性率的提高作用，作为大鼠学习和记忆进步的指标。训练结束后断头取脑测脑重及脑内RNA、DNA蛋白质含量。
3、脑内DNA、RNA 和蛋白质含量测定（2-4）
取大鼠脑组织加4ml冷蒸馏水制成匀浆，加入4ml冷20%三氯醋酸（TCA）使匀浆含TCA10%，离心（3000rpm，5min）得沉淀，用5%TCA4ml洗2次，悬浮在8ml2%过氯酸中，再水浴煮沸20分钟，冷却至室温后，3000rpm离心10分钟，上清液用乙醚洗2次后，取0.5ml用地衣酚法测RNA含量，取1ml用二苯胺法测DNA含量。沉淀加1ml蒸馏水后用乙醚洗2次，用Lowry法测蛋白含量。
4、脑缺血模型制备
选230±15g体重wistar大鼠60只，雌雄各半，即对照组、假手术对照组、阳性药对照组和李氏5号方低、中、高剂量组，对照组及假手术组按20ml/kg用生理盐水灌胃，阳性药对照用尼莫地平25mg/kg ig。李氏5号方低、中、高剂量组分别以李氏5号方胶囊1、2和4g/kg ig每天1次，共7天。于末次给药后1小时用乌拉坦0.8g/kg ig麻醉。分离并结扎双侧颈总动脉。假手术组分离双颈总动脉但不结扎，余处理同其它各组。术后8小时断头处死，取脑置-20℃冰冻。切取左前脑200mg，加冷蒸馏水4ml制成匀浆，3000rpm、4℃离心10min，取上清液0.5ml用硫代巴比妥法⑽测丙二醛（MDA）含量。取上清液0.5ml10%三氯醋酸离心沉淀蛋白后用对一羟基联苯比色法⑾测乳酸含量。切除右前脑200mg加5%高氯酸2ml制成匀浆，4000rpm、40℃离心10min，取上清液用20%KOH/20%K2HPO40.6ml中和PH至6.5，3000rpm离心10min取上清液用荧素酶液体闪烁计数法测ATP含量⑿；沉淀0.1mol/L NaOH溶解后用lowry法测蛋白含量。取双颞叶称湿重后置恒温烤箱80℃烤至恒重，准确称脑组织干重，求含水量。
5、抗缺氧试验：取20±2g，雄性小鼠75只，分5组，分别用生理盐水20ml/kg，氟桂嗪10ml/kg，李氏5号方1、2、4g/kg ig，每天1次，共7天，于末次给药后1小时放入145ml缺O2瓶内，记录小鼠呼吸停止时间，求出小鼠常压缺O2时的存活时间。另取20±1.6g雄性小鼠60只，同法分组给药，于末次给药后1h ip亚硝酸钠200mg/kg，记录生存时间。取50只体重为20.6±1.7g雄性小鼠同法分组给药，于末次给药后1小时ip氰化钾7.5mg/kg，记录小鼠存活时间。
6、氢可型肾虚小鼠模型制备
选14日龄幼年大鼠分两组，一组按每天40mg/kg连续皮下注射氢化可的松3天，另一组皮下注射等体积生理盐水作为对照。于停氢化可的松次日起分组给药，共分4组，每窝鼠均分在4个实验组内。给药组每天按2或4mg/kg用李氏5号方灌胃，正常对照组及模型组用等体积生理盐水灌胃，每天1次，共10天，于给药10天时断头处死，取肝、脾、胸腺称重，用冷蒸馏水制成匀浆，加等体积20%三氯醋酸（TCA）沉淀蛋白，离心（3000rpm，5min）得沉-5-5-

淀，用5%TCA2次，悬浮在2%高氯酸中，水浴煮沸20分钟冷却至室温后，3000rpm离心10min，上清液用乙醚洗2次后，用二苯胺法(13)测DNA含量，沉淀用乙醚洗2次后，用0.1mol/L NaOH溶解，用Loery(14)法测蛋白含量。
结 果
一、对学习和记忆的影响
1、 对小鼠记忆获得障碍的改善作用
小鼠102只，体重11~14g，雌雄各半，按体重随机分组。正常对照组和模型组用生理盐水按20ml/kg体重灌胃，阳性药对照组用1.5%脑复康按0.3g/kg灌胃，李氏5号方低、中、高剂量组分别按1、2、4g/kg灌胃。每天1次，共10天。于第十天给药2小时后进行跳台训练。模型组及各给药组于训练前20分钟腹腔注射东莨菪碱1ml/kg，造成健忘症模型。对照组小鼠腹腔注射等体积生理盐水。观察训练期间5分钟内错误反应次数作为学习能力指标；24小时后重作测定，记录潜伏期和5分钟内错误次数，作为记忆能力指标。

　　学习能力测定结果如表1。东莨菪碱模型组在学习期间5分钟内错误次数较对照组明显增多，差别极为显著（p<0.01），表明学习能力低下模型造型成功。李氏5号方1、2、4g/kg均使错误次数明显减少，和模型组比差别有显著性意义。李氏5号方此种提高小鼠学习能力的作用，呈剂量依赖性，以中高剂量组效果较好。
记忆能力测定结果见表1。和对照组比较，模型组小鼠潜伏期缩短而错误次数明显为多，差别极为显著（P<0.01）。给李氏5号方低、中、高剂量组小鼠潜伏期延长而错误次数减少，接近于正常对照组。此作用呈倒"U"字型量效关系。
2.对小鼠记忆再现障碍的改善作用
小鼠102只，体重11-14g，雌雄各半，按体重随机分6组。按表2灌胃给药，每天1次，共10天。对照组和模型组给以等体积生
理盐水。于末次给药后2小时进行避暗法训练，记录潜伏期。24小
时后进行测定。测定前三十分钟，模型组及给药各组用30%乙醇按0.1ml/10g体重灌胃。记录由明室进入暗室的潜伏期和5分钟内错误次数。
结果见表2，乙醇使小鼠记忆再现明显障碍，表现为避暗潜伏期缩短，错误次数增多。李氏5号方低、中、高剂量组小鼠测试时和模型组比较潜伏期延长、错误次数减少，基本接近正常对照组。

3．对成年小鼠记忆巩固障碍的改善作用
选18-22g体重小鼠96只，雌雄各半，按表3分5组。给药组每天分别用脑复康0.3/kg，李氏5号方1、2、4g/kg灌胃，每天一次。对照组和模型组给以等体积生理盐水。于给药第十天时用跳台法训练，记录5分钟内的错误次数，作为对正常鼠学习能力的测定。训练后除对照组外，其余各小组均立即皮下注射120mg/kg亚硝酸钠，造成脑缺氧性记忆巩固障碍模型。24小时后重新测定5分钟内错误次数，以观察小鼠的记忆能力。
结果，第一次训练时李氏5号方4g/kg剂量组即使正常成年小鼠错误次数减少，说明李氏5号方也能提高正常成年小鼠的学习能力。24小时后测试时模型组错误次数明显增多，和对照组比较，差别高度显著（P<0.01），说明亚硝酸钠已造成脑缺氧性记忆巩固不良，李氏5号方中剂量（2g/kg）组使测试小鼠错误次数显著减少，（P<0.05），表明李氏5号方对缺氧造成的记忆巩固障碍有改善作用。此作用量效曲线呈明显的倒"U"字形。即低、高剂量时作用较弱甚至无效。

4．对小鼠空间辨别障碍的改善作用
小鼠102只，体重11~14g，雌雄各半，按表4分组给药，每天一次，共10天。于第10天时进行迷宫训练，训练前20分钟模型组及给药各组腹腔注射东莨菪碱0.5mg/kg造成空间辨别障碍模型，对照组腹腔注射等体积生理盐水。记录达9/10次正确反应的电击次数为学习成绩，结果见表4。

结果，模型组给东莨菪碱后达标电击次数明显增多，和对照组比差别高度显著（P〈0.01），表明小鼠发生空间辨别障碍。李氏5号方1、2、4g/kg使达标电击次数明显减少，表明小鼠学习能力提高。此作用以中、高剂量组最为明显，有明显的量效关系。
5、对未成年大鼠穿梭箱主动回避反应性条件反射形成的影响
选30日龄大鼠62只，雌雄各半，断奶适应5天时进行分组。给药组分别用1、2、4g/kg李氏5号方和0.3g/kg脑复康灌胃，对照组用等体积生理盐水灌胃，每日1次，共18天，于给药第10天时开始用大鼠进行穿梭箱训练，记录每日主动回避反应阳性率作为大鼠学习和记忆的成绩。
结果见表5，对照组大鼠主动回避反应条件反射形成阳性率较低，训练第7天时才达34.6%，李氏5号方中剂量（2g/kg）组条件反射形成速度较对照组明显为快，阳性率明显为高，在训练开始后第2-6天和对照组比较差别均有显著性意义，以第3天最为显著，此结果反复重复、重现性甚好、非常稳定。低剂量组李氏5号方（1g/kg）训练开始后第2~4天主动回避反应条件反射形成阳性率较对照组稍高，但差别无显著性意义，第5~7天时基本接近对照组。李氏5号方高剂量（4g/kg）组训练开始后第2~6天主动回避反应条件反射形成阳性率高于对照组，第4天的阳性率和对照组比较有显著性差别。此结果之量效曲线呈倒"U"字形，即中剂量效果较好，低、高剂量组效果较差。

6、对未成年大鼠穿梭箱训练后RNA、DNA、蛋白质含量的影响结果见表6。
李氏5号方高剂量组脑重较对照组轻度增加，但差别无显著性意义。和对照组比，各剂量李氏5号方组脑中DNA、蛋白质含量均无显著差别。高剂量李氏5号方使大鼠脑中RNA显著升高，此作用有明显的量效关系。

二、改善脑能量代谢的作用
1、对小鼠急性脑缺血的影响
小鼠100只，分5组，按表7分组给药。每天1次，共15天。
于末次给药后断头处死，记录张口喘气时间，作为脑缺氧指标。观察药物对张口喘气时间的影响。结果见表7，李氏5号方1、2、4g/kg剂量依赖性地延长小鼠张口喘气时间，和对照组比较，中、高剂量组李氏5号方有显著性差别。表明李氏5号方有降低耗氧的作用。脑复康无此作用。

2、 对小鼠常压缺氧的影响
结果见表8。氟桂嗪10mg/kg和李氏5号方2或4g/kg均能显著延长常压缺氧下的存活时间，李氏5号方1g/kg无此作用。

3、对亚硝酸钠性缺氧的影响
结果表9。李氏5号方1g/kg和氟桂嗪10mg/kg均使亚硝酸钠性缺氧小鼠存活时间延长，2g/kg和4g/kg李氏5号方反而无此作用。

4、对氰化钾性缺氧的影响
结果见表10。李氏5号方各剂量组均未表现出对抗作用，和对照组比较，差别均无显著性的意义。

5、对大鼠急性不完全性脑缺血的影响
结果见表11 李氏5号方4g/kg使缺血脑组织含水量减轻，缺血脑组织蛋白含量减少，1、2g/kg李氏5号方无此作用。

6、对不完全性脑缺血大鼠脑丙二醛（MDA）含量的影响
结果见表12。大鼠脑缺血8小时时脑MDA含量明显升高，李氏5号方2、4g/kg均能使其明显降低。

7、对不完全性脑缺血大鼠脑能量代谢的影响
结果见表13。大鼠脑不完全性缺血8小时时，脑ATP含量明显减少，乳酸含量明显增加，李氏5号方4g/kg使缺血脑组织ATP消耗减少，同时乳酸生成明显减少。

三、 对动物发育的影响及整体功能的调节作用
1、 对未成年大鼠体重发育的影响
35日龄大鼠60只分5组，按表14分组给药，每天1次，共15天。于给药前、给药后第5天、第10天、第15天称重，观察药物对大鼠体重发育的影响。给药前各组动物体重无明显差别，给药后李氏5号方组大鼠体重明显较快，此作用以高剂量组（4g/kg）最为明显，在给药第10天时高剂量李氏5号方组大鼠体重和对照组比较，差别有显著意义（P<0.05），表明李氏5号方有促进未成年大鼠躯体发育的作用。脑复康未表现出此种作用。

2、 对氢可型肾虚幼年大鼠脑DNA、RNA和蛋白含量的影响。
选14日龄幼年大鼠分两组，一组按每天40mg/kg连续皮下注射
氢化可的松3天，另一组皮下注射等体积生理盐水作为对照。于停氢化可的松次日起分组给药，共分4组，每窝鼠均分在4个实验组内。给药组每天按2或4g/kg用李氏5号方灌胃，正常对照组及模型组用等体积生理盐水灌胃，每天1次，共10天。于给药第10天断头处死，按前法提取及测定脑内DNA、RNA和蛋白含量。
结果（表16）氢可造型3天时幼年大鼠体重明显下降、倦缩、怕冷、竖毛，肝、脾、胸腺萎缩，表明造型成立。脑中RNA及蛋白含量明显减少，李氏5号方使脑RNA含量有增加趋势，但差别无显著性。李氏5号方2g/kg和4g/kg均使脑蛋白含量明显增加（表15），此作用呈课题依赖性且高剂量组和肾虚模型组比差别显著（P<0.05），说明李氏5号方有促进肾虚幼年大鼠脑蛋白合成的作用。给药组大鼠DNA含量轻度增加，但和模型组比较，无显著性差别（P＞0.05）。

3、 对氢可肾虚幼年大鼠肝、脾、胸腺、DNA及蛋白含量的影响
结果见表16，幼年大鼠皮下注射氢化可的松后，肝、胸腺蛋白含量下降，肝、脾、腺重量减轻，DNA含量下降，4g/kg李氏5号方使肝、胸腺蛋白含量明显增加，肝、脾、胸腺重量增加，DNA含量增多，结果均有显著性意义。

四、 对小鼠刻板抬头运动的影响
小鼠18~22g，雌雄各半，分5组，分别灌服李氏5号方1、2、4g/kg，阴性对照组和阳性对照组灌服等体积生理盐水，每天1次，共15天。阴性对照组及李氏5号方组于末次灌胃后1小时腹腔注射左旋多巴0.8g/kg。阳性对照组皮下注射25mg/kg氯丙嗪，15分钟后腹腔注射左旋多巴0.8g/kg，其余各组小鼠皮下注射等体积生理盐水。给左旋多巴10分钟后将小鼠置一倒置的钟型玻璃罩内，观察-16-30分钟的刻板抬头次数。各组小鼠在末次测定24小时前同法观察未给左旋多巴时是否有刻板抬头运动。
结果见表17。李氏5号方本身不引起刻板抬头运动，说明其无
拟多巴胺样作用。但剂量依赖性地增加左旋多巴诱发的小鼠刻板抬头次数，说明该药有增加多巴胺能神经功能的作用。

讨 论
精神发育迟滞（智力低下，MR）所包括的范围很广。MR性脑型瘫痪时除运动功能障碍外，大多数患者伴有智力低下，促智治疗是治疗脑瘫的重要环节。
脑型瘫痪是出生前、出生时或出生后脑损伤造成的永久性脑损害。运动功能障碍的原因是上位神经元（大脑皮层、基底神经元、小脑等）对下位神经失去调节能力所致。所以治疗脑瘫应从提高上位神经元特别是大脑皮层的功能入手。
长期以来，一般认为神经细胞受损害后没有再生能力，国内外医学将脑瘫列为不治之症。经临床观察、证实，李氏5号方对脑瘫引起的弱智、运动障碍等有良好的改善作用。这说明该药对上位神-17-经元特别是大脑皮层的功能有增强作用。因而研究李氏5号方治疗脑瘫的作用，必须从其对大脑皮层功能的影响出发。
学习和记忆是大脑皮层的高级功能。在动物实验中，人们无法直接观察动物脑内思维变化过程，只能从对某种刺激的反应来判断
学习记忆实验方法就是从对动物行为的观察来判定动物"智力"的高低。
学习记忆实验包括被动回避反应试验，如跳台法、避暗法；空间辨别实验如电迷宫法；主动回避反应实验如大鼠穿梭箱反应性条件反射。本实验用多种模型及方法进行研究，证实了李氏5号方确有可靠的促智作用，且对记忆的不同阶段如记忆获得、记忆巩固和记忆再现功能均有不同程度的提高。
药物的促智作用，在正常动物上不易表现出来，多用记忆损伤模型动物进行实验。乙酰胆碱是脑内参与学习和记忆的重要神经递质，用东莨菪碱阻断中枢M-胆碱受体，阻断中枢胆碱能神经元冲动传导，造成动物学习能力低下、记忆获得障碍。在跳台实验中，李氏5号方1、2、4g/kg体重（相当于人的临床剂量为0.1、0.2和0.4g/kg体重），明显纠正东莨菪碱造成的小鼠学习能力低下和记忆获得障碍；在迷宫实验中，李氏5号方2、4g/kg明显改善东莨菪碱引起的小鼠空间辨别障碍，证明李氏5号方有提高中枢胆碱能神经元功能、易化传导、增强学习和记忆能力的作用。
记忆再现障碍型多用30%乙醇造型。乙醇对记忆再现的干扰作用机理不清，但此模型稳定，灵敏度高及重复性好，是促智药药理研究的重要模型。本实验中观察到，1、2、4g/kg李氏5号方对抗乙醇引起的记忆再现障碍，说明该药在多个环节能提高小鼠的记忆力。
大鼠穿梭箱反应性条件反射实验工作量大，在药物初筛时一般不用。此实验一般需用成年大鼠，未成年大鼠条件反射形成阳性率低。本实验用35日龄未成年大鼠开始实验，对照组条件反射形成速度慢、阳性率低，说明本实验所用大鼠脑功能发育尚不成熟，这就给观察到药物的促智作用提供了良好的条件。用李氏5号方后，特别是中剂量组（2g/kg）大鼠条件反射形成速度明显加快，阳性率明显提高，此作用稳定，重现性甚好，连续5次差别均有显著性意义，这证明李氏5号方有加快未成年大鼠脑功能发育的作用。李氏5号方的此种作用对精神发育迟滞小儿或脑瘫患者，无疑会产生有益的影响。
本实验证实，李氏5号方使小鼠断头后张口喘气时间延长，说明其有抗脑缺氧作用。大鼠结扎双侧颈总动脉造成不完全性脑缺血后，李氏5号方使脑缺血大鼠脑水肿减轻，同时使脑缺血引起的组织蛋白含量增加减少，说明该药有抗脑缺血，减轻缺血脑组织细胞血管通透性增加引起的血浆蛋白的外渗、减轻脑水肿的作用。不完全性脑缺血时，由于缺氧与通过侧支循环的不完全性供氧并存，生成大量氧自由基及脂质过氧化物，导致脑细胞损伤。李氏5号方能使缺血脑组织过氧化脂质代谢产物MDA生成减少，提示其有抑制不完全性脑缺血时氧自由基生成及脂质过氧化物形成，减轻脑细胞损伤的作用；同时李氏5号方明显改善缺血时的脑能量代谢，表现为缺血脑组织乳酸含量减少而ATP消耗减慢，这说明了李氏5号方有保护脑细胞、减轻脑损伤、降低脑能量消耗，提高能量利用率促进脑功能恢复的作用。
哺乳动物组织细胞内DNA含量恒定，因此组织DNA含量的变化可反映组织细胞数目的变化。李氏5号方使肾虚幼年大鼠肝、脾、胸腺DNA含量增加，说明其有刺激细胞增生的作用；使肾虚大鼠肝、脾、胸腺及脑蛋白含量增加，使正常大鼠血红蛋白含量增加（参考
长期毒性试验资料），同时促进大鼠体重增长，这些结果表明，李氏5号方有生长激素样作用，这些作用对患儿整体机能的提高无疑将会产生有益影响。
通过学习而获得的经验与行为，是由神经元内部的RNA分子的结构承担贮存任务，也即通过细胞内特殊RNA结构变化的密码使新的经验长久保存下来，所以RNA属于记忆分子（6）。李氏5号方明显提高大鼠训练后脑RNA含量，此作用可能和其促智作用有关。 此外，RNA含量增多，可指导合成更多的酶蛋白，使脑细胞活化，调节功能增强。氢可型肾虚幼年大鼠脑蛋白的含量明显降低，李氏5号方促使脑蛋白含量明显增加，证明本方有补肾、填髓、益脑，促进脑发育的作用。李氏5号方对正常大鼠脑蛋白合成无影响，但肾虚幼儿年大鼠在脑蛋白含量偏低的情况下，又有促进脑蛋白质合成，使脑内蛋白含量趋于正常，这正符合祖国医学"虚则补之"的理论。
脑内的多巴胺能神经通路（8－9）主要有：1、黑质纹状体通路，此通路中多巴胺能神经兴奋时外周肌张力降低，胆碱能神经兴奋时外周肌张力增强，二者处于动态平衡状态，调节骨胳肌张力，使运动协调。李氏5号方增强左旋多巴诱发的小鼠刻板运动，说明其具有增强多巴胺能神经功能的作用。脑瘫患者运动障碍型多数骨胳肌张力过高，临床上用李氏5号方治疗后肌痉挛减轻，四肢运动更加协调，这可能和该药多巴胺能神经功能的作用有关。2、结节－漏斗通路，此通路中多巴胺能神经兴奋时垂体前叶分泌生长激素增多。李氏5号方明显促进未成年大鼠体重增长，促进幼年肾虚大鼠肝、胸腺细胞增生和胸腺、肝、脑蛋白以及血红蛋白合成，临床上也观察到该药明显促进患者体格发育，这些都属于生长激素样作用。这可能和其增强多巴胺能神经功能，促进生长激素释放有关。
脑型瘫痪是大脑的永久性损伤，传统理论认为神经元死后无再生能力，临床上对该病又无有效的治疗药物，故现阶段医学界对该病的治疗基本处于束手无策的状态，脑瘫的基础研究基本处于停滞状态。临床资料证实，李氏5号方对脑瘫患者脑功能（智力、运动调节）有明显的改善作用。本实验证实，该药有明显的促智作用，对动物学习和记忆的不同环节都有易化作用，而且对未成年鼠均有作用，证明其提高脑功能的作用无年龄界限，这和临床上该药对幼儿及成年人均有效的结果一致。此外该药促进信使物质RNA合成，促进脑蛋白质合成，这些脑细胞生化机能的改变，必将提高残存脑细胞的功能，使脑细胞活化，提高大脑的调节功能。李氏5号方增强多巴胺能神经功能的作用，必将使脑性痉挛性瘫痪的患者肌张力降低，运动机能更加协调。其促进动物体重增长，促进儿童体格发育，促进肝、脾腺细胞增生，促进脑、肝、胸腺等组织蛋白及血红蛋白合成，这些生长激素样作用将对患者的整体机能调节产生有益的影响。
结 论
对李氏5号方进行了促智作用及脑发育影响的研究。小鼠和大鼠所用剂量为每天1、2、4g/kg体重，相当于人的临床用量为0.1、0.20和0.40g/kg体重，灌胃给药，每天一次，共10~18天。初步研究结果表明，该药有以下药理作用：
一、 促进学习和记忆
1、 促进记忆获得，对小鼠记忆获得障碍有明显的改善作用。
2、 促进记忆再现，改善小鼠记忆再现障碍。
3、 促进记忆巩固，改善小鼠记忆巩固障碍。
4、 提高小鼠空间辨别能力，使小鼠在迷宫中学习成绩明显提高。
5、促进未成年大鼠条件反射的形成，使未成年大鼠穿梭箱反应条件反射主动回避阳性率提高、条件反射形成速度加快。同时脑内RNA含量增加。
二、 改善脑能量代谢
1、 延长小鼠断头后张口喘气时间及常压缺氧时小鼠存活时间。
2、 大鼠急性不完全脑缺血时脑组织含水量减少，脑组织蛋白含量增加幅度（反应血浆蛋白外渗）减轻，缺血时脑水肿减轻，说明其有抑制自由基生成、减轻细胞损伤作用。
3、 使缺血时大鼠脑ATP消耗减少，乳酸生成减少，说明有改善脑能量代谢的作用。
三、 对躯体及脑发育的影响
1、 促进发育期大鼠体重增长。
2、提高未成年大鼠脑内RNA含量。促进氢可型肾虚幼年大鼠脑蛋白质合成，表明有促进脑发育的作用。
3、本药尚能使氢可型肾虚小鼠肝、脾、胸腺细胞增生，肝、胸腺蛋白合成增多，正常大鼠血红蛋白含量增加，并促进动物体重增加，这些生长激素样作用，可能和增强多巴胺能神经功能，促进生长激素释放有关。
四、使左旋多巴诱发的小鼠刻板抬头增强，表明增强多巴胺能神经功能作用。
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试验单位：兰州医学院药理学教研室
试验者：吴勇杰 副教授
试验日期：1995年4月~9月
资料保存处：兰州医学院药理教研室
联系人：吴勇杰，730000，兰州